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    日本研究人員使用頂尖技術(shù)在實(shí)驗(yàn)室中制造出了卵子和精子。而現(xiàn)在，科學(xué)家不得不決定如何安全且合乎道德地使用這些細(xì)胞。

    從去年10月開(kāi)始，分子生物學(xué)家Katsuhiko Hayashi已經(jīng)收到了不少電子郵件，其中大多數(shù)是中年夫妻，他們都為一件事感到絕望：生育孩子。一位處于更年期的英國(guó)女人提出到Hayashi位于京都大學(xué)的實(shí)驗(yàn)室來(lái)，希望他可以在這件事上幫助她。“這是我唯一的愿望。”她寫道。這些請(qǐng)求始于Hayashi發(fā)表的一項(xiàng)研究結(jié)果。通過(guò)對(duì)小鼠的皮膚細(xì)胞進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)，Hayashi培養(yǎng)出了原始生殖細(xì)胞（PGCs），為了驗(yàn)證這些細(xì)胞與自然生長(zhǎng)的PGCs是否真的相同，他又用其創(chuàng)造出卵子乃至活鼠。這一結(jié)果提高了通過(guò)不孕女性的皮膚細(xì)胞產(chǎn)生受精卵的可能性；它同時(shí)還表明，男人的皮膚細(xì)胞也可以用來(lái)產(chǎn)生卵子，女人的皮膚細(xì)胞也能制造出精子。 公眾對(duì)該實(shí)驗(yàn)的關(guān)注出乎Hayashi和資深教授Mitinori Saitou的意料。他們已經(jīng)在哺乳動(dòng)物配子生產(chǎn)和對(duì)其進(jìn)行體外重建的領(lǐng)域研究了十多年，但這些都是為了科學(xué)研究，而不是治療。當(dāng)他們將這項(xiàng)研究從小鼠推進(jìn)到猴子甚至人類時(shí)，他們正在給未來(lái)的不孕不育治療做鋪墊。

    而科學(xué)家和公眾則要開(kāi)始面對(duì)隨之而來(lái)的倫理問(wèn)題了。“不言而喻，他們真的在小鼠中改變了這一領(lǐng)域。”美國(guó)加州大學(xué)洛杉磯分校生育專家Amander Clark說(shuō)，“現(xiàn)在，為了避免該技術(shù)在證明其用處之前遭到破壞，我們不得不開(kāi)始討論這種配子方式的倫理問(wèn)題。” 小鼠實(shí)驗(yàn) 在小鼠的生長(zhǎng)過(guò)程中，胚胎發(fā)育第一周后就會(huì)出現(xiàn)生殖細(xì)胞（約40個(gè)PGCs），進(jìn)而雄鼠和雌鼠會(huì)分別形成大量的精子和卵子。Saitou希望了解這些細(xì)胞的成長(zhǎng)過(guò)程是由哪些信號(hào)指導(dǎo)的。在過(guò)去的10年中，他發(fā)現(xiàn)一些基因在特定時(shí)間的特定組合對(duì)PGCs生長(zhǎng)有重要作用。使用這些基因作為標(biāo)記，他能夠從其他細(xì)胞中挑選出PGCs進(jìn)行研究。

    2009年，在神戶市理化研究所，他發(fā)現(xiàn)在適宜的培養(yǎng)條件下，在適當(dāng)時(shí)間添加骨形成蛋白4（Bmp4）可以將胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)化為PGCs。以色列雷霍沃特市魏茨曼科學(xué)研究所的干細(xì)胞專家Jacob Hanna稱，Saitou一絲不茍遵循自然過(guò)程的方法與其他人的研究形成鮮明對(duì)比。Saitou試圖精確發(fā)現(xiàn)生殖細(xì)胞形成的要素，去除多余的信號(hào)并注意各種分子起作用的時(shí)間的做法，令人印象深刻。英國(guó)謝菲爾德大學(xué)的干細(xì)胞生物學(xué)專家Harry Moore將這種對(duì)生殖細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程的認(rèn)真重建稱為“一場(chǎng)勝利”。Saitou的研究起點(diǎn)是從活鼠外胚層提取的細(xì)胞，但為了真正控制實(shí)驗(yàn)過(guò)程，他希望使用現(xiàn)成的培養(yǎng)細(xì)胞。

    2009年，Hayashi離開(kāi)劍橋大學(xué)回到日本后加入了Saitou的研究，他通過(guò)借鑒其他研究，使用關(guān)鍵的調(diào)節(jié)分子（活化素A）和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子來(lái)引導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化為外胚層，然后將其應(yīng)用于Saitou之前的研究，促使其成為PGCs，這一過(guò)程獲得了成功。Hayashi將這些人工培養(yǎng)的PGCs注入自身無(wú)法產(chǎn)生精子的小鼠體內(nèi)，使其成功形成了精子。研究團(tuán)隊(duì)再將這些精子注入卵子中，并將胚胎置于雌鼠體內(nèi)，從而得到了本不能生育的小鼠的后代。 人工PGCs大有可為 其他研究人員已經(jīng)可以復(fù)制該過(guò)程以獲得實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的PGCs，不過(guò)據(jù)《自然》雜志稱，尚未有研究團(tuán)隊(duì)利用此方法培養(yǎng)出活的動(dòng)物。人工PGCs對(duì)研究表觀遺傳學(xué)的科學(xué)家有特殊作用：對(duì)決定基因表達(dá)的DNA進(jìn)行生物化學(xué)修改。這些修改——多數(shù)是向DNA堿基添加甲基——在一些情況下，會(huì)攜帶著有機(jī)體的歷史記錄（例如，曾在子宮接觸到的外界化學(xué)物質(zhì)等）。表觀遺傳標(biāo)記在胚胎發(fā)育期間像對(duì)其他細(xì)胞一樣對(duì)PGCs進(jìn)行作用，不過(guò)PGCs很獨(dú)特，因?yàn)楫?dāng)生長(zhǎng)成為精子和卵子后，其表觀遺傳標(biāo)記便會(huì)消失，從而產(chǎn)生一個(gè)能形成所有細(xì)胞類型的受精卵。微妙的表觀遺傳變化中的錯(cuò)誤會(huì)導(dǎo)致不育，并產(chǎn)生睪丸癌等疾病。Hanna的團(tuán)隊(duì)已經(jīng)開(kāi)始利用人工PGCs研究表觀遺傳調(diào)控中個(gè)別酶的作用，并且在將來(lái)可能會(huì)發(fā)現(xiàn)表觀遺傳網(wǎng)絡(luò)與疾病的相關(guān)性。Hanna表示，的確，體外形成的PGCs為科學(xué)家的研究提供了數(shù)以百萬(wàn)計(jì)的細(xì)胞，使研究不再局限于通過(guò)解剖早期胚胎才能得到的少量細(xì)胞。“這很重要，因?yàn)槲覀儞碛辛诉@些經(jīng)歷著重大的全基因組表觀遺傳變化的罕見(jiàn)細(xì)胞——PGCs，我們對(duì)該過(guò)程了解得并不多。”Hanna說(shuō)。Clark同意Hanna的看法：“體外模式為科學(xué)家提供了前所未有的研究可行性。” 臨床相關(guān)性 然而，Hayashi和Saitou并不能向那些不能生育的夫妻提供什么幫助。在研究結(jié)果可以應(yīng)用于臨床之前，還有大量問(wèn)題需要解決。Saitou和Hayashi發(fā)現(xiàn)，盡管通過(guò)他們的技術(shù)產(chǎn)生的后代通?？雌饋?lái)健康且可生育，但是這些后代所產(chǎn)生的PGCs卻并不完全“正常”。第二代的PGCs經(jīng)常會(huì)產(chǎn)生脆弱、畸形的卵子。在受精后，這些卵子經(jīng)常會(huì)分裂成為有3組染色體的細(xì)胞，而正常的會(huì)分裂成兩組。另外，人工PGCs產(chǎn)生后代的成功率只有正常體外受精的1/3。哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院研究表觀遺傳學(xué)的Yi Zhang使用了Saitou的方法，發(fā)現(xiàn)體外形成的PGCs并不能像自然生成的PGCs那樣消除其之前的表觀遺傳編程。他說(shuō)：“我們必須意識(shí)到這些像PGCs的細(xì)胞并不是PGCs。”將PGCs用于不孕不育治療將是一個(gè)巨大的飛躍，包括Saitou在內(nèi)的很多科學(xué)家都敦促須謹(jǐn)慎進(jìn)行該研究。該技術(shù)可安全用于猴子的事實(shí)有助于緩解這些憂慮，但是在確定該方法是否安全之前需要有多少只猴子安全出生呢？需要得到多少代呢？最終，人類胚胎將需要被制造并測(cè)試，而這一過(guò)程會(huì)因?qū)τ糜谘芯康呐咛ブ圃斓南拗贫兊镁徛?。Saitou利用雄鼠的誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS）生成精子，并使用雌鼠的iPS產(chǎn)生了卵子，他表示，逆轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)應(yīng)該是有可能的。

    如此一來(lái)，就可以從同一只小鼠獲得卵子和精子，并用于繁殖，產(chǎn)生一種從未出現(xiàn)過(guò)的東西：自我繁殖的小鼠。Hayashi和Saitou都還沒(méi)有準(zhǔn)備好嘗試這一研究。“如果有科學(xué)需要，我會(huì)做實(shí)驗(yàn)，但只在小鼠身上。”Saitou說(shuō)。兩位科學(xué)家已經(jīng)感受到了病人和日本資助機(jī)構(gòu)要求其繼續(xù)實(shí)驗(yàn)的壓力。該技術(shù)應(yīng)該是不能進(jìn)行體外受精的女性，以及在童年時(shí)患癌癥而不能產(chǎn)生精子或卵子的病人的最后希望。Hayashi提醒那些寫信給他的人，可行的不孕治療可能在未來(lái)10年甚至是50年才會(huì)出現(xiàn)。“我的印象是它很遙遠(yuǎn)，我不想給人們那些不切實(shí)際的希望。”他說(shuō)。病人會(huì)看到小鼠實(shí)驗(yàn)的成功結(jié)果，但是經(jīng)常會(huì)忽略這些尖端技術(shù)背后多年的艱苦工作。Hayshi表示，他們并沒(méi)有意識(shí)到從小鼠轉(zhuǎn)向人的實(shí)驗(yàn)意味著幾乎要重新開(kāi)始。因?yàn)槿祟愒缙谂咛ヅc小鼠的完全不同。