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骨關(guān)節(jié)結(jié)核的臨床診斷主要依據(jù)臨床表現(xiàn)和輔助檢查的X線片及CT片,但病原學(xué)診斷還需依賴細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)。但因?yàn)殚L(zhǎng)期應(yīng)用抗結(jié)核藥物及取材、培養(yǎng)等因素,使細(xì)菌培養(yǎng)的陽(yáng)性率很低,一般不超過(guò)20%,而且培養(yǎng)的時(shí)間也較長(zhǎng),需要3~8周隨著生物技術(shù)的發(fā)展,聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)的誕生,國(guó)外很多學(xué)者已將PCR技術(shù)應(yīng)用于骨關(guān)節(jié)結(jié)核的病理診斷中,并收到了優(yōu)良效果,現(xiàn)已有標(biāo)準(zhǔn)的模板結(jié)核DNA及相應(yīng)的引物合成試劑,應(yīng)用簡(jiǎn)單。其實(shí)驗(yàn)方法為取一2mm3大小的結(jié)核組織塊加入 Mris、NaOH、SDS等制成乳劑,經(jīng)煮沸、離心及苯芬***/異戊醇混合液提取,NaAC和無(wú)水乙醇沉淀后,進(jìn)行PCR擴(kuò)增,再于1.2g%瓊脂糖凝膠電泳,然后于紫外燈下觀察色帶。PCR擴(kuò)增法檢測(cè)的是結(jié)核菌中細(xì)胞核內(nèi)的D)NA,其陽(yáng)性敏感率較細(xì)菌培養(yǎng)法大大提高,而且微量細(xì)菌或已被殺死細(xì)胞的LNA存在,就可以檢測(cè)出來(lái),也就是說(shuō)只要檢測(cè)物中含有結(jié)核菌的DNA,即可擴(kuò)增出!DNA的特異片段。因此,檢測(cè)物中即使無(wú)活細(xì)菌或檢測(cè)物是經(jīng)過(guò)固定液固定后,均不影響檢測(cè)結(jié)果。而且PCR擴(kuò)增技術(shù)僅需2天就可以報(bào)告結(jié)果,大大縮短了檢測(cè)時(shí)間,為臨床診斷提供了重要依據(jù)。
由上述可見(jiàn),PCR技術(shù)的應(yīng)用具有敏感、快速、高效、特異等優(yōu)點(diǎn),是一種在基因水平上診斷結(jié)核的技術(shù),對(duì)各種骨關(guān)節(jié)結(jié)核的診斷和鑒別診斷具有特殊意義。