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    2月5日，來自軍事醫(yī)學科學院放射與輻射醫(yī)學院研究所、第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院、日本京都大學和華中農(nóng)業(yè)大學獸醫(yī)學院等處的研究人員，在Nature旗下子刊《Gene Therapy》發(fā)表一項最新研究成果，題為“Harnessing the clustered regularly interspaced short palindromic repeat （CRISPR）/CRISPR-associated Cas9 system to disrupt the hepatitis B virus”. 在這項研究中，研究人員探討了靶定HBV抗原（HBsAg）編碼區(qū)的CRISPR/CRISPR相關(guān)Cas9系統(tǒng)，在細胞培養(yǎng)系統(tǒng)和***動物體內(nèi)的效果。結(jié)果表明，CRISPR/Cas9可在體內(nèi)和體外抑制HBV**和表達，可能是HBV感染一種新的治療策略。

    乙型病毒性肝炎是由乙肝病毒（HBV）引起的、以肝臟炎性病變?yōu)橹?，并可引起多器官損害的一種疾病。乙肝廣泛流行于世界各國，主要侵犯兒童及青壯年，少數(shù)患者可轉(zhuǎn)化為肝硬化或肝癌。因此，它已成為嚴重威脅人類健康的世界性疾病，也是我國當前流行最為廣泛、危害性最嚴重的一種疾病。目前，對乙型肝炎病毒（HBV）感染的治療方法還是有限的。

    近年來，基因組編輯工具應用廣泛，而成簇的規(guī)律間隔的短回文重復序列（CRISPR）技術(shù)更是掀起了基因組編輯的熱潮。CRISPR是自然存在于細菌DNA中的序列，與CRISPR相關(guān)（Cas）核酸酶共同起作用，指導RNAs保護細菌基因組免受侵入性噬菌體中檢測到的靶向特異性序列的攻擊。最近已經(jīng)出現(xiàn)原理論證研究，利用該系統(tǒng)的高序列特異性，來治療動物模型中的遺傳性疾病，以及制備來源于受影響患者的無病干細胞。CRISPR還可讓我們制備具有特異基因突變的小鼠模型，能比現(xiàn)有方法在更短的時間段內(nèi)達到研究目的。據(jù)報道，在2014年早些時候， CRISPR-Cas系統(tǒng)已經(jīng)成工作為一種工具，在人類細胞中執(zhí)行高效、高特異性的全基因組篩選，2014年在增強靶標特異性方面已經(jīng)取得了巨大的進步，從而為尋找人類健康和疾病相關(guān)的基因功能，開辟了無限的可能性。延伸閱讀：Science綜述：CRISPR-Cas9系統(tǒng)的歷史和未來。

    在這項研究中，研究人員探討了靶定HBV表面抗原（HBsAg）編碼區(qū)的CRISPR/CRISPR相關(guān)Cas9系統(tǒng)，在細胞培養(yǎng)系統(tǒng)和動物***內(nèi)的效果。研究人員通過定量酶聯(lián)免疫吸附測定，分析了細胞培養(yǎng)基和小鼠血清中的HBsAg水平。利用定量PCR和HBsAg表達，研究人員評估了小鼠肝臟組織中的HBV DNA水平。

    結(jié)果發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過CRISPR/Cas9處理后，細胞培養(yǎng)物和小鼠血清所分泌的HBsAg量降低。免疫組化分析結(jié)果表明，在CRISPR/Cas9-S1+X3處理的小鼠肝臟組織中幾乎沒有HBsAg陽性細胞。CRISPR/Cas9系統(tǒng)可有效地在HBV DNA中產(chǎn)生突變。因此，CRISPR/Cas9可在體內(nèi)和體外抑制HBV的**和表達，從而可能是HBV感染一種新的治療策略。