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    2月5日，來(lái)自軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射與輻射醫(yī)學(xué)院研究所、第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院、日本京都大學(xué)和華中農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院等處的研究人員，在Nature旗下子刊《Gene Therapy》發(fā)表一項(xiàng)最新研究成果，題為“Harnessing the clustered regularly interspaced short palindromic repeat （CRISPR）/CRISPR-associated Cas9 system to disrupt the hepatitis B virus”. 在這項(xiàng)研究中，研究人員探討了靶定HBV抗原（HBsAg）編碼區(qū)的CRISPR/CRISPR相關(guān)Cas9系統(tǒng)，在細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)和***動(dòng)物體內(nèi)的效果。結(jié)果表明，CRISPR/Cas9可在體內(nèi)和體外抑制HBV**和表達(dá)，可能是HBV感染一種新的治療策略。

    乙型病毒性肝炎是由乙肝病毒（HBV）引起的、以肝臟炎性病變?yōu)橹鳎⒖梢鸲嗥鞴贀p害的一種疾病。乙肝廣泛流行于世界各國(guó)，主要侵犯兒童及青壯年，少數(shù)患者可轉(zhuǎn)化為肝硬化或肝癌。因此，它已成為嚴(yán)重威脅人類健康的世界性疾病，也是我國(guó)當(dāng)前流行最為廣泛、危害性最嚴(yán)重的一種疾病。目前，對(duì)乙型肝炎病毒（HBV）感染的治療方法還是有限的。

    近年來(lái)，基因組編輯工具應(yīng)用廣泛，而成簇的規(guī)律間隔的短回文重復(fù)序列（CRISPR）技術(shù)更是掀起了基因組編輯的熱潮。CRISPR是自然存在于細(xì)菌DNA中的序列，與CRISPR相關(guān)（Cas）核酸酶共同起作用，指導(dǎo)RNAs保護(hù)細(xì)菌基因組免受侵入性噬菌體中檢測(cè)到的靶向特異性序列的攻擊。最近已經(jīng)出現(xiàn)原理論證研究，利用該系統(tǒng)的高序列特異性，來(lái)治療動(dòng)物模型中的遺傳性疾病，以及制備來(lái)源于受影響患者的無(wú)病干細(xì)胞。CRISPR還可讓我們制備具有特異基因突變的小鼠模型，能比現(xiàn)有方法在更短的時(shí)間段內(nèi)達(dá)到研究目的。據(jù)報(bào)道，在2014年早些時(shí)候， CRISPR-Cas系統(tǒng)已經(jīng)成工作為一種工具，在人類細(xì)胞中執(zhí)行高效、高特異性的全基因組篩選，2014年在增強(qiáng)靶標(biāo)特異性方面已經(jīng)取得了巨大的進(jìn)步，從而為尋找人類健康和疾病相關(guān)的基因功能，開(kāi)辟了無(wú)限的可能性。延伸閱讀：Science綜述：CRISPR-Cas9系統(tǒng)的歷史和未來(lái)。

    在這項(xiàng)研究中，研究人員探討了靶定HBV表面抗原（HBsAg）編碼區(qū)的CRISPR/CRISPR相關(guān)Cas9系統(tǒng)，在細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)和動(dòng)物***內(nèi)的效果。研究人員通過(guò)定量酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定，分析了細(xì)胞培養(yǎng)基和小鼠血清中的HBsAg水平。利用定量PCR和HBsAg表達(dá)，研究人員評(píng)估了小鼠肝臟組織中的HBV DNA水平。

    結(jié)果發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過(guò)CRISPR/Cas9處理后，細(xì)胞培養(yǎng)物和小鼠血清所分泌的HBsAg量降低。免疫組化分析結(jié)果表明，在CRISPR/Cas9-S1+X3處理的小鼠肝臟組織中幾乎沒(méi)有HBsAg陽(yáng)性細(xì)胞。CRISPR/Cas9系統(tǒng)可有效地在HBV DNA中產(chǎn)生突變。因此，CRISPR/Cas9可在體內(nèi)和體外抑制HBV的**和表達(dá)，從而可能是HBV感染一種新的治療策略。