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    Sysmex CA-50血凝儀操作規(guī)程

    一?！吨袊?guó)輸血技術(shù)操作規(guī)程》（血站部分）對(duì)第Ⅷ因子凝血活性（FⅧ：C）和纖維蛋白原含量的質(zhì)量控制要求：

    （一）新鮮冰凍血漿的質(zhì)量檢查

    1.抽樣：每月一次隨機(jī)抽取新鮮冰凍血漿4袋，用于特殊檢查。

    2.檢查項(xiàng)目：FⅧ：C

    （1）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：FⅧ：C應(yīng)≥0.71U/ml

    （2）測(cè)定方法：使用血凝儀測(cè)定

    （二）冷沉淀質(zhì)量檢查：

    1.抽樣：每批至少隨機(jī)抽取4袋。

    2.檢查項(xiàng)目：FⅧ：C

    （1）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：FⅧ：C應(yīng)≥80IU/袋

    （2）測(cè)定方法：使用血凝儀測(cè)定

    3.纖維蛋白原含量：

    （1）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：纖維蛋白原含量應(yīng)≥150mg/袋

    （2）測(cè)定方法：使用血凝儀測(cè)定

    （三）上述內(nèi)容可參照衛(wèi)計(jì)委頒發(fā)的《中國(guó)輸血技術(shù)操作規(guī)程》（血站部分）中第五章質(zhì)量控制操作規(guī)程。

    二。SysmexCA-50血凝儀測(cè)定FⅧ：C和纖維蛋白原含量的方法：

    （一）SysmexCA-50血凝儀的特點(diǎn)：

    1.散射光的檢測(cè)方法：最先進(jìn)的檢測(cè)方法，多在全自動(dòng)血凝儀上使用。

    2.凝固點(diǎn)采用百分比檢測(cè)方式（自動(dòng)扣除本底）。

    A.對(duì)散射光變化小的（低纖維蛋白原）和變化速度慢的標(biāo)本（凝固時(shí)間延長(zhǎng)）均可準(zhǔn)確檢測(cè)。

    B.可有效去除黃疸、乳糜血、高脂血癥的干擾。

    3.用生物活性法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線，儀器可自動(dòng)換算FⅧ：C的活性百分比和纖維蛋白原的濃度。

    （二）測(cè)試方法與流程

    1.FⅧ：C

    血漿5ul+緩沖液45ul+因子缺乏血漿50ul→儀器自動(dòng)恒溫1分，加APTT試劑50ul→儀器自動(dòng)恒溫3分，加氯化鈣50ul→關(guān)蓋自動(dòng)測(cè)定

    2.Fbg（纖維蛋白原含量）

    血漿10ul+緩沖液90ul→儀器自動(dòng)恒溫3分，加Fbg試劑50ul→關(guān)蓋自動(dòng)測(cè)定

    3.在實(shí)際的測(cè)定過(guò)程中，為避免微量稀釋的誤差增大問(wèn)題，建議進(jìn)行加量稀釋，在取需要的量進(jìn)行測(cè)定。

    4.注意事項(xiàng)：新鮮冰凍血漿袋或冷沉淀袋從低溫冰箱中去出后應(yīng)立即置入37℃水浴中輕輕搖動(dòng)，使之在6分中內(nèi)溶化，立即取樣用于FⅧ：C的測(cè)定或Fbg含量的測(cè)定。

    （三）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制（CA-50）：標(biāo)準(zhǔn)曲線是根據(jù)測(cè)試結(jié)果的凝固時(shí)間計(jì)算各運(yùn)算項(xiàng)目的參數(shù)，如FⅧ：C的活性及Fbg的濃度。

    1.校正血漿

    （1）如果使用市售的校正血漿，應(yīng)遵循所附參數(shù)表的參數(shù)值和使用方法。

    （2）如果自配FⅧ：C的校正血漿，取20名以上健康人的新鮮混合血漿，按9:1的比例加入3.8%的枸櫞酸納抗凝劑。此血漿的FⅧ：C活性認(rèn)定為100%.

    2.標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)的求法：通過(guò)事先測(cè)試已知活性（或濃度）的標(biāo)本，求出標(biāo)準(zhǔn)曲線的數(shù)據(jù)。校正血漿通過(guò)幾次對(duì)倍稀釋即可獲得不同活性（或濃度）的式樣，分別取相應(yīng)的量進(jìn)行FⅧ：C（或Fbg）的測(cè)試。以測(cè)定結(jié)果為依據(jù)，輸入標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)并打印曲線確認(rèn)。

    FⅧ：C計(jì)量單位的說(shuō)明：

    1.臨床上通常定義正常人的混合血漿的FⅧ：C的活性為100%,對(duì)等于1lu/ml,即：

    FⅧ：C100%=1lu/ml

    2.新鮮冰凍血漿質(zhì)量質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：

    FⅧ：C≥0.7IU/ml對(duì)等于FⅧ：C≥70%

    3.冷沉淀質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：

    FⅧ：C≥80IU/袋

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