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淋病的實驗室檢測

淋病是一種常見的性病，在我國有著很高的感染人數(shù)，對人體有著很大的危害，但近幾年來，從我國的淋病疫情數(shù)據(jù)分析中，揭示出很多的問題，淋病的人數(shù)是有著下降的趨勢的，并且男女比例有著很大的差異，從數(shù)據(jù)分析來看，目前仍然存在著淋病病例（特別是女性病例）發(fā)現(xiàn)不足，這個原因有很多，但檢測篩查的力度不足是一個重要的原因，很多的醫(yī)療機構，對淋病的檢測還有著一些不正確的認識，下面就淋病的實驗室檢測做一個簡單的分析。

一、淋病實驗室檢測方法

目前，我國淋病的實驗室常規(guī)檢測方法為：直接顯微鏡檢查淋球菌；分離培養(yǎng)淋球菌；核酸檢測。

1、直接顯微鏡檢查淋球菌：

在顯微鏡直接檢查中，染色是很重要的一步，染色方法一般常用的是革蘭氏染色，還有美蘭染液，姬姆薩染液，熒光抗體。革蘭染色為傳統(tǒng)方法，因簡便、快捷及價廉，仍然為最廣泛采用的方法。革蘭染色將菌分為二大類，即染成紫色的革蘭陽性菌及染成紅色的革蘭陰性菌。

直接顯微鏡檢查的臨床意義：男性淋菌性尿道炎的尿道標本敏感性及特異性可高達95%～99%，具診斷價值；宮頸標本、無癥狀男性尿拭子及取自直腸的涂片時，敏感性僅40～70%；不推薦直接顯微鏡檢查診斷直腸和咽部淋球菌感染；亦不能用于療后判愈；如果在多形核細胞外見到形態(tài)典型的革蘭陰性雙球菌，需做培養(yǎng)進行確證。

2、淋球菌培養(yǎng)：

培養(yǎng)條件：35℃～36℃，含5%～10%CO2，濕潤（70%濕度）的環(huán)境。CO2環(huán)境可由CO2培養(yǎng)箱、CO2產(chǎn)氣袋及燭缸提供。使用燭缸時，應使用白色、無芳香味的無毒性蠟燭，在燭缸底部放些浸水棉球以保持一定的濕度。培養(yǎng)時間：24～48小時。

培養(yǎng)24小時后檢查平皿，此時沒有菌生長的平皿應繼續(xù)培養(yǎng)至48小時，仍無菌生長才可丟棄，作出淋球菌培養(yǎng)陰性的報告，對選擇性培養(yǎng)基上分離的直徑在0.5～1mm，無色、灰白色的半透明菌落應作進一步鑒定。

對結(jié)果初步鑒定淋球菌的主要依據(jù)，一個是看菌落特征，還有就是氧化酶試驗，以及革蘭染色。

來自泌尿生殖道符合初步鑒定標準的分離株，一般可診斷為淋球菌，準確性達98%。對于菌落形態(tài)不典型的分離株，來自咽部、眼睛、或其他泌尿生殖道外部位的分離株，來自低危人群（如兒童）的分離株，以及涉及醫(yī)療法律案例的分離株，應作確證試驗。主要有糖發(fā)酵試驗或細菌自動鑒定儀等。

分離培養(yǎng)法為淋病實驗室檢測的“金標準”，女性淋病患者，男、女直腸和咽部淋球菌感染培養(yǎng)的敏感性81～100%。特異性100%，可發(fā)現(xiàn)無癥狀淋球菌感染患者，可用于進一步作藥敏試驗，可用于治療后的判愈試驗。

但大部分醫(yī)療機構的臨床上都不開展培養(yǎng)，因為試驗需要一定的時間，而且整個試驗操作較為繁瑣，對醫(yī)生的確診來說，花的時間過長，不能及時給病人診斷和治療。

3、核酸檢測：

目前在我國，核酸檢測還在發(fā)展之中，還有待進一步的完善，但這個檢測方法是未來的趨勢，在以后的工作中，一定會作為一種常規(guī)的檢測，以更加利于疾病的診斷。

核酸檢測一般有：經(jīng)典方法，實時熒光法，全自動及快速法，目前國內(nèi)大部分用的是熒光法。

它的特點是：敏感性、特異性高；不依賴于活的病原體的存在；無需特殊運送條件；可采用尿液等非侵入性標本；可以做多重項目的檢測。

核酸擴增檢測技術用于臨床診斷面臨的挑戰(zhàn)有：所需的儀器設備和試劑價格比較昂貴，在一般實驗室尚不能配備；不能做抗生素敏感性試驗；用于判愈試驗需在治療后至少3周以上。

二、標本的采集

淋病的檢測中，標本的采集尤其重要，如果沒有規(guī)范的采集好標本，對試驗的結(jié)果是有很大的影響的，可能會造成不正確的結(jié)果，對淋病的臨床確診做出錯誤的判斷。

從人群分類采樣：

1、男性：異性戀者，采集尿道標本，有口淫史者加取咽部標本；同性戀者，采集尿道、直腸及咽部標本。

2、女性：采集宮頸標本，必要時從尿道、直腸、咽部、前庭大腺和尿道旁腺取材。

3、幼女：幼女和/或處女膜未破的感染者標本：采集陰道分泌物。

4、新生兒眼炎患者：采集眼結(jié)膜分泌物。

從采樣部位分類：

1、尿道：男性患者，用手指從陰莖根部向尿道口方向擠壓，有癥狀患者可擠出膿液，用取樣拭子蘸取膿液作涂片或培養(yǎng)。對擠壓后無明顯分泌物時，采用男用取材拭子插入尿道2～3cm，稍用力轉(zhuǎn)動，保留數(shù)秒鐘再取出，以采集到粘膜上皮細胞。

女性患者，可抵著恥骨聯(lián)合輕輕按摩尿道口，擠壓出分泌物。如果無明顯分泌物，可用同男性相似的上述方法取材。

2、宮頸：避免使用防腐劑和潤滑劑，因為這些物質(zhì)對淋球菌有抑制作用。仔細檢查陰道壁和宮頸，如果宮頸口外面的分泌物較多，先用無菌棉拭清除過多的宮頸粘液。將一取樣拭子插入宮頸管內(nèi)1～2cm，稍用力轉(zhuǎn)動，保留10～30秒后取出。

3、眼部：用男性采樣拭子在眼結(jié)膜處蘸取分泌物或輕繞眼結(jié)膜。

4、直腸：將取樣拭子插入肛門2～3cm，從緊靠肛環(huán)邊的隱窩中取材，避免接觸糞便。

5陰道：青春期前女孩可采集陰道標本。將取樣拭子置于陰道后穹窿10～15秒，采集陰道分泌物。

6、咽部：從咽后壁或扁桃體隱窩取材。

三、藥敏試驗

近年來全球淋病流行趨勢嚴峻，淋病已成為全球公共衛(wèi)生熱點，淋病的耐藥越來越引起重視，未來淋病的發(fā)展形勢嚴峻。

目前耐藥檢測監(jiān)測技術面臨的挑戰(zhàn)：耐藥監(jiān)測點的覆蓋面不全面，不能及時發(fā)現(xiàn)臨床治療失敗病例，臨床上不能精準規(guī)范用藥，對耐藥的科學研究開展不足。

為了做好耐藥工作，我國制定了《遏制細菌耐藥國家行動計劃（2016-2020年）》，進一步加強抗菌藥物臨床應用管理。

目前耐藥方法有：瓊脂紙片擴散法（定性），Etest（定量），瓊脂稀釋法（定量），微量稀釋法（定量），全自動細菌鑒定分析儀（定性），質(zhì)譜法（MALDITOF）（定性），分子生物學方法（定性）。一般常用的為瓊脂紙片擴散法和Etest。

1、瓊脂紙片擴散法：

特點：快速，簡便，價廉，但只能用于定性，已經(jīng)有大量的商品化生產(chǎn)，可以及時指導臨床用藥。

2、Etest法：

特點：快速，簡便，可以進行定量，但價格高價高，也已經(jīng)有了商品化的生產(chǎn)?？梢杂糜谥笇R床用藥，同時可以作為耐藥的監(jiān)測。