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    12天可以用來做什么

    中國科學(xué)家用12天的時(shí)間，研發(fā)制備了H7N9全病毒滅活疫苗。

    4月8日至20日，呼吸疾病國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室研究人員在全球共享禽流感數(shù)據(jù)倡議組織（GISAID）獲得H7N9病毒基因信息后，他們通過基因合成及利用反向遺傳病毒拯救技術(shù)，在短短的12天里，就獲得了供動物實(shí)驗(yàn)用的H7N9重組病毒疫苗株（AH-H7N9-PR8），制備了研究用滅活全病毒疫苗。

    疫苗迫在眉睫

    呼吸疾病國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室常務(wù)副主任陳凌表示，目前，對抗流感病毒最主要的“三板斧”——奧司他韋、扎那米韋和帕那米韋都是通過抑制流感病毒的神經(jīng)氨酸酶來控制病毒。使用達(dá)菲的最佳時(shí)間是發(fā)病后48小時(shí)之內(nèi)。然而絕大多數(shù)流感患者確診時(shí)已發(fā)病多日，臨床上也觀察到許多病人用藥后的病毒載量仍居高不下。

    2013年，復(fù)旦大學(xué)研究團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)H7N9病毒對達(dá)菲已出現(xiàn)基因突變和耐藥趨勢。

    達(dá)菲的有效性也存在爭議。2014年4月，非營利性國際循證醫(yī)學(xué)協(xié)作組研究人員在分析20項(xiàng)達(dá)菲的實(shí)驗(yàn)后，得出無證據(jù)支持達(dá)菲具有防止流感病毒傳播或降低患者住院率和并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)作用的結(jié)論。該報(bào)告對世界上許多國家儲備達(dá)菲以預(yù)防流感大流行的做法提出了質(zhì)疑。

    “作為臨床學(xué)科的國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新發(fā)突發(fā)傳染病出現(xiàn)后，最緊要的是應(yīng)急救治，降低死亡率。”陳凌介紹說。呼吸疾病國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室正致力于該方面研究。該實(shí)驗(yàn)室是在中國工程院院士鐘南山的倡議下，為適應(yīng)呼吸疾病研究的發(fā)展趨勢，由廣州醫(yī)科大學(xué)和中國科學(xué)院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院聯(lián)合共建的。

    2005年，國內(nèi)發(fā)生了數(shù)起人感染H5N1禽流感的病例，多數(shù)病人最終死亡。但深圳有一例重癥患者在接受了早前一位康復(fù)者的血漿后得以痊愈。

    “毫無疑問，疫苗接種是預(yù)防流感病毒感染的最有效手段，前提是發(fā)生了大規(guī)模的人傳人感染。”陳凌說。

    “雖然以往疫苗企業(yè)生產(chǎn)人用流感疫苗的病毒株都是由WHO（世界衛(wèi)生組織）提供。我們?nèi)杂斜匾M早知道H7N9疫苗是否能有效誘導(dǎo)產(chǎn)生抗病毒抗體。”陳凌說。團(tuán)隊(duì)的研究表明，全病毒滅活疫苗在小鼠和獼猴中可誘導(dǎo)高滴度的抗H7N9中和抗體；通過添加氫氧化鋁佐劑或者進(jìn)行二次免疫，極低劑量的疫苗也可誘導(dǎo)高滴度的中和抗體。

    在中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)室動物研究所秦川教授團(tuán)隊(duì)的協(xié)助下，研究人員在P3生物安全動物實(shí)驗(yàn)室里先給實(shí)驗(yàn)小鼠注射了由H7N9疫苗免疫小鼠和獼猴制備的抗血清，然后再用致死劑量的H7N9病毒攻擊。結(jié)果顯示，滅活重組全病毒疫苗可產(chǎn)生有效的免疫保護(hù)，同時(shí)也提示H7N9疫苗免疫者或康復(fù)者個(gè)體的血漿可以用于預(yù)防H7N9感染或治療H7N9感染患者的可行性。

    “除非H7N9流感病毒出現(xiàn)嚴(yán)重的人傳人，大量生產(chǎn)及使用H7N9疫苗的可能性很低。我們開展的疫苗研究一方面證實(shí)了我們具備了技術(shù)能力，另一方面主要是用制備的疫苗株用來免疫馬匹或獼猴來制備抗病毒血清制品。”陳凌說。

    “流感病毒患者康復(fù)后的幾個(gè)月內(nèi)血液中含有較高的抗病毒中和抗體，所以如果將其血漿輸給另一位病人可以迅速中和病人體內(nèi)的病毒，從而幫助病人戰(zhàn)勝病魔。”雖然如此，但陳凌知道禽流感的康復(fù)者有限，一方面不一定愿意捐獻(xiàn)血漿，另一方面也要符合不是肝炎病毒及其他病毒攜帶者的條件。這給疫苗制備造成了現(xiàn)實(shí)困境。

    未來可期

    有沒有辦法在短時(shí)間內(nèi)獲得可以用于應(yīng)急治療的抗病毒抗體呢？研究人員把目光轉(zhuǎn)向了體型龐大的馬。它可以提供上萬毫升血液而不影響其健康，而且馬抗血清制品具有悠久的生產(chǎn)及使用歷史。

    從2013年4月起，呼吸疾病國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室與中國軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院軍事獸醫(yī)研究所開展了協(xié)作。在鐘南山和夏咸柱兩位中國工程院院士的大力支持下，科研人員立即在東北的馬場用自己制備的滅活重組H7N9病毒疫苗免疫了數(shù)匹馬。經(jīng)測試，幾次加強(qiáng)免疫后的馬匹產(chǎn)生了效價(jià)過萬的抗病毒抗體，而在H7N9 感染康復(fù)者血清測到的抗體效價(jià)通常僅有幾百。科研人員從這些馬匹提取了幾萬毫升血清。然而，馬血清含有各種對人體而言的異體蛋白，具有高致敏性而不能被直接用于治療病人?？蒲腥藛T將馬血清經(jīng)過一系列步驟提純出抗體免疫球蛋白，然后把與致敏最有關(guān)的Fc片段去除，這樣就大大降低了致敏性?？蒲腥藛T按照藥典及制備生物制品的標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)出了一批馬抗H7N7精制免疫球蛋白，目前研究人員正在進(jìn)行動物實(shí)驗(yàn)以確定其有效性和安全性。

    “大自然總在和我們開玩笑。每次有新發(fā)突發(fā)傳染病來襲，全國就如臨大敵，動用甚至耗費(fèi)了許多資源。從2003年的SARS冠狀病毒，到幾年前的H5N1,再到去年和今年的H7N9,雖然每次都是不同的‘狼來了’，卻常常是各種輕重***一起上。我們應(yīng)該通過系統(tǒng)的研究，產(chǎn)生一套類似標(biāo)準(zhǔn)操作流程的臨床應(yīng)急救治應(yīng)對措施。我期待未來新發(fā)突發(fā)傳染病來襲時(shí)，我們的臨床應(yīng)急救治的技術(shù)手段可以更加成熟，最大限度降低重癥及死亡率，應(yīng)對成本也能降到最低。”陳凌相信，在鐘南山的領(lǐng)導(dǎo)下，H7N9病毒疫苗的成功研發(fā)將指日可待。