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    1963年，Randel等提出了“葡萄糖-脂肪酸循環(huán)”學(xué)說，認(rèn)為葡萄糖和脂肪酸的氧化代謝存在相互競爭，提示脂肪酸在代謝中存在重要作用。近來的研究發(fā)現(xiàn)，血漿游離脂肪酸（free fatty acid，F(xiàn)FA）濃度的升高與糖尿病、動脈硬化以及多種代謝疾病均有密切的關(guān)系，因此在各種代謝疾病中進(jìn)行FFA的研究已經(jīng)成為內(nèi)分泌代謝領(lǐng)域的一個(gè)熱點(diǎn)。

    最開始FFA采用萃取滴定法或氣相色譜法和高效液相層層析法測定，相當(dāng)復(fù)雜，花費(fèi)也比較高，主要在基礎(chǔ)研究中使用，難以進(jìn)入臨床實(shí)用。現(xiàn)在FFA可以采用通過自動分析儀進(jìn)行快速大量的測定，在國內(nèi)部分醫(yī)院中FFA已經(jīng)成為臨床的常規(guī)檢測，可以直接作為血脂檢查的一個(gè)項(xiàng)目進(jìn)行化驗(yàn)，檢測方便，花費(fèi)也很小，能夠?yàn)榕R床提供更多的幫助。但是判斷FFA的結(jié)果和判斷其他血脂檢查的結(jié)果一樣嗎？患者一次FFA結(jié)果異常我們?nèi)绾魏突颊呓忉屇?？很多人可能對FFA具體的測定方法、結(jié)果的穩(wěn)定性和可能的干擾因素還不太了解，我們有必要對FFA的測定進(jìn)行比較深入的了解。

    FFA實(shí)際上更加準(zhǔn)確的稱呼是非酯化脂肪酸或未酯化脂肪酸（non-esterified fatty acid，NEFA），它與酯化的脂肪酸如甘油三酯等相對應(yīng)。FFA約占血總脂肪酸的10%。血中脂肪酸主要為長鏈脂肪酸，一般不溶于水，在血中FFA與白蛋白結(jié)合進(jìn)行運(yùn)輸，是一種簡單的脂蛋白。所以FFA中游離的意義和游離睪酮或游離皮質(zhì)醇的意義是不一樣的，F(xiàn)FA中的游離主要是指非酯化，它實(shí)際上是和白蛋白結(jié)合的，而游離睪酮或游離皮質(zhì)醇中的游離是指未和結(jié)合蛋白結(jié)合的激素，我們應(yīng)該注意這個(gè)區(qū)別。

    目前臨床上的FFA測定主要通過酶學(xué)比色法進(jìn)行測定，又稱為ACS-ACOD法。其原理是FFA首先在乙酰輔酶A合成酶（Acyl-CoA synthetase，ACS）的催化下變?yōu)橹］o酶A，然后脂酰輔酶A在脂酰輔酶A氧化酶（Acyl-CoA oxidase，ACOD）的催化下產(chǎn)生過氧化氫，過氧化氫與顯色劑進(jìn)行反應(yīng)后產(chǎn)生藍(lán)紫色的物質(zhì)，可以吸收550 nm波長的光，從而可以通過比色法進(jìn)行FFA濃度的測定。從中可以看出，ACS-ACOD法并不是直接測定FFA的濃度，而是通過它產(chǎn)生的過氧化氫進(jìn)行間接的比色測定，因此測定時(shí)存在受到氧化-還原物質(zhì)和含顏色物質(zhì)的影響的可能。通過ACS-ACOD法測定FFA，各單位需要在本單位的試驗(yàn)條件下確定各自的正常值，因此可能不同醫(yī)院正常值會有所不同。

    在判斷FFA的臨床意義之前我們首先要了解FFA的代謝途徑。FFA是機(jī)體的主要能量物質(zhì)，人體的50%～90%熱能需要由血漿中循環(huán)的FFA供給。正常人體以這種方式每小時(shí)周轉(zhuǎn)的脂肪酸量高達(dá)25 g。FFA的半衰期僅有1～2 min。因此FFA的變化是比較快的。FFA的來源是從消化道吸收入血，脂蛋白脂酶水解脂蛋白復(fù)合物中的甘油三酯或膽固醇酯，脂肪細(xì)胞內(nèi)的脂酶水解儲存的甘油三酯。其中最主要的是脂肪細(xì)胞內(nèi)的脂酶水解儲存的甘油三酯，有多個(gè)激素可以影響這一過程。影響該過程的激素首先也是胰島素，胰島素是一個(gè)促進(jìn)脂肪合成的激素，在進(jìn)餐后抑制脂肪分解，所以餐后FFA減少，而饑餓時(shí)FFA增加。β腎上腺素系統(tǒng)是非常重要的促進(jìn)脂肪分解的機(jī)制，運(yùn)動和應(yīng)激可以通過腎上腺素分泌增加FFA的含量。

    從以上影響因素可以看出饑餓和運(yùn)動可以造成生理性的FFA增加。所以應(yīng)該注意抽血的時(shí)間，F(xiàn)FA的測定患者需要空腹，但空腹時(shí)間過長脂肪分解增加也可以增加FFA的濃度，抽血前要盡量避免劇烈運(yùn)動和應(yīng)激，隨機(jī)采取血漿測定FFA在臨床上是沒有意義的。FFA在抽血后需要馬上進(jìn)行測定，這是因?yàn)檠械闹久溉缰鞍字负土字傅瓤梢运庵井a(chǎn)生FFA，因此如果放置一段時(shí)間后再進(jìn)行測定可能會假性增加FFA的濃度。所以要想非常準(zhǔn)確地測定FFA，最好預(yù)冷抽血的試管，整個(gè)檢測均在冰上進(jìn)行。如果不能及時(shí)測定可以冰凍保存，而4 ℃時(shí)血標(biāo)本可以保存2 d。另外血中甘油三酯水平很高（＞1000 mg/dl）時(shí)，離體標(biāo)本中脂肪酶分解產(chǎn)生的FFA會更多，使結(jié)果出現(xiàn)假性增高[3]。由于肝素可以增加脂蛋白酯酶的活性，增加血中的FFA濃度，因此在使用肝素抗凝的患者中FFA的測定是不可靠的，從由肝素抗凝的套管針中抽血也有可能對FFA的測定產(chǎn)生很大影響，另外抽血時(shí)不能使用肝素抗凝的抽血管，而乙二胺四乙酸（EDTA）、枸櫞酸等抗凝不會影響FFA的測定。雖然ACS-ACOD法需要用到氧化反應(yīng)及比色法，但是一般來說，維生素C和溶血不會影響結(jié)果，膽紅素可能會輕度減少測定值。

    從上一段我們可以看到，F(xiàn)FA由于受到的干擾因素較多，包括空腹時(shí)間的長短、抽血前運(yùn)動的情況，甚至前一天的飲食和運(yùn)動都有可能對結(jié)果產(chǎn)生較大影響，所以不同日期測定結(jié)果也會有較大的波動。在一個(gè)研究中[4]，對12位健康個(gè)體進(jìn)行了連續(xù)12 d的空腹常見代謝變量（包括血糖、甘油三酯和FFA等）的測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，同一個(gè)體的FFA在不同日期測定有著相當(dāng)大的波動，個(gè)體內(nèi)變異達(dá)到45%，而個(gè)體間變異（不同個(gè)體之間的差別）則只有32%，也就是說不同日期的個(gè)體內(nèi)變異超過了個(gè)體間變異。而在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)中空腹血糖測定的個(gè)體內(nèi)變異是4.8%，個(gè)體間變異是7.5%，所以一次的空腹血糖測定能夠相對比較準(zhǔn)確地反應(yīng)患者平時(shí)的血糖水平。而空腹甘油三酯水平的個(gè)體內(nèi)變異為21%，個(gè)體間變異為20%，甘油三酯的個(gè)體內(nèi)測定變異水平是比較高的，我們在臨床工作中也會有體會，今天測定的甘油三酯水平可能會與過幾天測定的甘油三酯水平有比較大的差別。在許多研究中甘油三酯水平不能獨(dú)立地預(yù)測心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)，甘油三酯測定波動大也是其中的重要原因之一。與之對比，高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）與甘油三酯水平呈非常好的負(fù)相關(guān)，但不同日期測定的波動非常小，因而在多變量分析中發(fā)現(xiàn)HDL-C與心血管疾病的相關(guān)性要比甘油三酯水平與心血管疾病的相關(guān)性更好。而FFA的個(gè)體內(nèi)變異水平還要高于甘油三酯，這就對單獨(dú)一次測定FFA能否作為一個(gè)準(zhǔn)確的指標(biāo)打上了問號。我們知道，對于水平波動比較大的代謝指標(biāo)，我們可以采取多次測定取平均值的方法來更準(zhǔn)確地判斷，對于FFA，需要測定15次取平均值才能有80%的把握使結(jié)果的準(zhǔn)確度控制在±15%之內(nèi)。而對于空腹血糖，測定一次就可以達(dá)到相同的把握度，空腹甘油三酯則需要測定3次取平均值。因此，從統(tǒng)計(jì)學(xué)角度，F(xiàn)FA的一次測定結(jié)果可能不能準(zhǔn)確地反應(yīng)個(gè)體的實(shí)際情況。

    在對FFA濃度結(jié)果進(jìn)行判定時(shí)還有一個(gè)需要注意的問題，即FFA可以有不同的長度和不同的飽和度，我們測定的FFA實(shí)際上是這些不同長度和飽和度的脂肪酸的混合物。正常血清中十八碳的油酸占54%，十六碳的軟脂酸占34%，十八碳的硬脂酸占6%，另外還有少量十二碳的月桂酸、十四碳的肉豆蔻酸和二十碳的花生四烯酸。不同的脂肪酸，如飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸起的作用是不一樣的，飽和脂肪酸對代謝產(chǎn)生不良影響，而不飽和脂肪酸則對飽和脂肪酸的不良影響有保護(hù)作用。飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸之間的比例受到食物中這兩種成分比例的影響。所以，單從FFA的總濃度有時(shí)不能精確地判斷脂肪酸的作用是有益的還是有害的，如果能結(jié)合其中飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸的比例進(jìn)行分析，可能更有利于預(yù)后的判斷。具體測定不同脂肪酸的含量一般需要使用高效液相色譜法，目前還不能進(jìn)入常規(guī)的臨床使用。

    綜上所述，F(xiàn)FA在技術(shù)上已經(jīng)可以方便快捷地在臨床工作中進(jìn)行測定，但由于FFA水平受到的干擾因素較多，在分析結(jié)果時(shí)首先要注意標(biāo)本采集的條件，是否為空腹，抽血前避免劇烈運(yùn)動和應(yīng)激，抽血后標(biāo)本是否及時(shí)送檢；其次由于FFA的個(gè)體內(nèi)變異水平較大，單次抽血結(jié)果的分析需要謹(jǐn)慎。隨著FFA測定在臨床工作中更多的應(yīng)用，我們需要更多的總結(jié)這項(xiàng)指標(biāo)的臨床意義，以便更好地為臨床工作服務(wù)。（游離脂肪酸做好作為常規(guī)臨床檢測的準(zhǔn)備了嗎 張化冰，肖新華）