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    在本次ASH年會(huì)中，除了公布血液系統(tǒng)腫瘤和淋巴瘤臨床方面的最新進(jìn)展外，淋巴瘤病理領(lǐng)域的探索也是大會(huì)關(guān)注的重點(diǎn)之一。中山大學(xué)腫瘤醫(yī)院病理科饒慧蘭教授結(jié)合中國的臨床實(shí)踐情況，特選取其中一項(xiàng)相關(guān)研究進(jìn)行了簡要報(bào)道。

    彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤（DLBCL）分為生發(fā)中心B細(xì)胞樣（GCB型）及活化B細(xì)胞樣（**型）兩種不同分子亞型。但基因表達(dá)譜分型方法并不能廣泛應(yīng)用于常規(guī)診斷，且目前常用的免疫組化方法多被認(rèn)為存在重復(fù)性問題。

    為避免這些分類方法的局限性，盧米妮（Ruminy）等開展了一種簡易有效的分析方法，他們構(gòu)建了10個(gè)基因表達(dá)標(biāo)志物來區(qū)分**型與GCB型。**型基因標(biāo)志物包括IRF4、**P1、IGHM、TNFRSF13B和CCND2,GCB型則包括LMO2、MYBL1、BCL6、NEK6和TNFRSF9.

    研究者使用逆轉(zhuǎn)錄酶多重連接依賴性探針擴(kuò)增技術(shù)（RT-MLPA）進(jìn)行檢測，同時(shí)也檢測cMYC及BCL2基因的表達(dá)，CCND1和MS4A1基因作為內(nèi)對(duì)照。研究者首先分別在各50例患者中采用該技術(shù)進(jìn)行了驗(yàn)證性和***效應(yīng)分析。

    在141例在法國貝克雷爾醫(yī)療中心接受化療聯(lián)合利妥昔單抗治療的患者中，研究者采用RT-MLPA法鑒定了49例GCB型和64例**型，28例未能分型。與預(yù)期結(jié)果相同，**型患者無事件生存率明顯較差（P=0.015），且OS率也有較低的趨勢（P=0.060）。

    單因素分析證實(shí)，LMO2低表達(dá)（P=0.005）、BCL6低表達(dá)（P=0.012）、IRF4高表達(dá)（P=0.008）及TNFRSF13B高表達(dá)（P=0.004）與不良預(yù)后顯著相關(guān)。同時(shí)，研究也證實(shí)MYC（+）/BCL2（+）“雙重打擊”DLBCL與不良預(yù)后顯著相關(guān)（P=0.012）。最后，研究通過提取石蠟包埋組織的RNA準(zhǔn)確地將12例DLBCL分類，結(jié)果可以證明實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性。

    研究認(rèn)為，RT-MLPA是一項(xiàng)快速、經(jīng)濟(jì)和有效的檢測方法，可以在一天內(nèi)完成，可以同時(shí)測量40個(gè)病例；且該1次檢測低于5美元；同時(shí)，RT-MLPA法并不需要特別的設(shè)備，只需要一個(gè)常規(guī)的聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）模塊和一個(gè)毛細(xì)管基因分析儀，可以檢測石蠟包埋組織，也可以在許多常規(guī)診斷實(shí)驗(yàn)室間方便地傳送分析結(jié)果。

    點(diǎn)評(píng)

    2001年WHO淋巴瘤分類中DLBCL雖是一類***疾病，但明顯存在異質(zhì)性，被認(rèn)為是診斷大B細(xì)胞淋巴瘤的“垃圾桶”.2008年WHO淋巴瘤分類根據(jù)新的臨床、免疫及遺傳學(xué)研究成果，對(duì)DLBCL重新分類，首次提出DLBCL非特殊型，更新了DLBCL亞型。

    阿里扎德（Alizadeh）利用基因芯片技術(shù)將DLBCL劃分為GCB型和**型。二者致瘤機(jī)制不同，**型通過激活NFκB通路而致瘤，通常在3q、18q21-q22出現(xiàn)基因插入以及在6q21-q22出現(xiàn)基因丟失；而GCB型則缺乏NFκB通路激活證據(jù)，常在12q12出現(xiàn)基因丟失。同時(shí)大量研究表明，**型預(yù)后較GCB型差，因?yàn)榍罢吒喑霈F(xiàn)cMYC基因表達(dá)異?；騝MYC/BCL2“雙重打擊”.

    目前國內(nèi)通過免疫組化檢測CD10、BCL6及IRF4/MUM1三者表達(dá)情況將彌DLBCL分為GCB和非生發(fā)中心樣（non-GCB）兩個(gè)亞組，CD10+或CD10-、BCL6+和IRF4/MUM1-的病例為GCB型，其他均為non-GCB型。該結(jié)果得到多數(shù)研究證實(shí)，但也被其他一些研究質(zhì)疑。

    目前通過免疫組化標(biāo)記設(shè)置的亞型分組還不能應(yīng)用至常規(guī)臨床實(shí)踐中，僅用于預(yù)后分析，其中最大的障礙之一就是免疫組化染色程序和結(jié)果判讀的重復(fù)性。

    近幾十年來，DLBCL的治療從CHOP方案到聯(lián)合利妥昔單抗，患者生存狀況顯著改善。目前新的靶向治療藥物如CD40單抗、CD30單抗、NFκB抑制劑等讓DLBCL患者獲益。臨床的需求需要病理醫(yī)生的診斷更準(zhǔn)確，分型更細(xì)致。

    該研究顯示RT-MLPA法在基因水平上為DLBCL的分型提供了更好的檢測平臺(tái)，比免疫組化更可靠，信息更全面，確實(shí)是一項(xiàng)快速、經(jīng)濟(jì)和有效的檢測方法。當(dāng)然，未來需要用更多病例及臨床數(shù)據(jù)來證實(shí)該方法分型優(yōu)于免疫組化，更接近基因圖譜分析法。